常用滅菌參數(shù)
在檢品中存在微量的微生物時，往往難以用現(xiàn)行的無菌檢查法檢出。因此，有必要對滅菌方法的可靠性進行驗證。F與F0值可作為驗證滅菌可靠性的參數(shù)。
（一）D值與Z值
D值是指在一定溫度下，殺滅90%微生物（或殘存率為10%）所需的滅菌時間。在一定滅菌條件下，不同微生物具有不同的D值；同一微生物在不同滅菌條件下，D值亦不相同。因此D值隨微生物的種類、環(huán)境和滅菌溫度變化而異。
Z值是指滅菌時間減少到原來的1/10所需升高的溫度或在相同滅菌時間內(nèi)，殺滅99%的微生物所需提高的溫度。
（二）F值與F0值
1．F值
F值為在一定溫度（T）下，給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效果與在參比溫度（T0）下給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效果相同時，所相當?shù)臏缇鷷r間，以min為單位。F值常用于干熱滅菌。
F值的數(shù)學表達式如下：
式中，Δt為測量被滅菌物溫度的時間間隔，一般為0.5～1min，T為每個時間間隔Δt所測得被滅菌物溫度，T0為參比溫度。
2．F0值
F0值為一定滅菌溫度（T）下，Z為10℃時所產(chǎn)生的滅菌效果與121℃，Z值為10℃所產(chǎn)生的滅菌效果相同時所相當?shù)臅r間（min）。也就是說，不管溫度如何變化，t分鐘內(nèi)的滅菌效果相當于在121℃下滅菌F0 分鐘的效果。
在濕熱滅菌時，參比溫度定為121℃，以嗜熱脂肪芽孢桿菌作為微生物指示菌，該菌在121℃時，Z值為10℃。則：
顯然，即把各溫度下滅菌效果都轉(zhuǎn)化成121℃下滅菌的等效值。因此稱F0為標準滅菌時間（min）。F0目前僅應(yīng)用于熱壓滅菌。
標準滅菌時間
按F0=Ft * 10(t-121)/10計算，F(xiàn)0要大于8，在160--170度是短時間就能做到的，為什么干熱滅菌要兩小時以上呢？
答：濕熱滅菌和干熱滅菌的效果是不同的， 飽和蒸汽的穿透性比干熱空氣穿透強得多,蒸汽冷凝時放出的潛熱傳給待滅菌品,使之升溫并使待滅菌品所帶的微生物尤其是表面的微生物發(fā)生水合作用, 從而加速了它們的死亡。所以在達到同樣滅菌效果的前提下,濕熱滅菌所需要的時間要短得多。
（公式 F0=Ft * 10(t-121)/10 只適合于濕熱滅菌 ,F0系T=121℃及Z=10℃下的FT值。如果把121℃理解為“標準狀態(tài)”,那么F0可理解為“標準滅菌值”）
滅菌法
滅菌法系指用熱力或其他適宜方法將物質(zhì)中的微生物殺死或除去的方法。本法適用于無菌、滅菌制劑、敷料和縫合線等生產(chǎn)過程中的滅菌。對產(chǎn)品(包括**終容器及包裝)而言，選擇滅菌方法的效果，必須在實際應(yīng)用前予以驗證。在執(zhí)行GMP的原則下，滅菌方法的滅菌效果與滅菌設(shè)備的性能、污染菌的特性、被滅菌品的性質(zhì)、受污染的程度等因素有關(guān)。應(yīng)采
取必要的措施降低被滅菌品滅菌前的微生物污染及滅菌后的再次污染。
滅 菌 方 法
一、濕熱滅菌法
本法系指物質(zhì)在
滅菌器內(nèi)利用高壓蒸汽或其他熱力學滅菌手段殺滅細菌，滅菌能力甚強，為熱力學滅菌中**有效及用途**廣的方法。藥品、藥品的溶液、玻璃器械、培養(yǎng)基、無菌衣、敷料以及其他遇高溫與濕熱不發(fā)生變化或損壞的物質(zhì)，均可用本法滅菌。
1.濕熱滅菌的有關(guān)參數(shù)
(1)D值
D值即微生物的耐熱參數(shù)，系指一定溫度下，將微生物殺滅90%(即使之下降一個對數(shù)單位)所需的時間，以分(鐘)表示。D值越大，說明該微生物的耐熱性越強。不同的微生物在不同環(huán)境條件下具有各不相同的D值。
(2)Z值
Z值即滅菌溫度系數(shù)，系指使某一種微生物的D值下降一個對數(shù)單位，滅菌溫度應(yīng)升高的值(℃)，通常取10℃。
(3)FT值
FT值為滅菌程序所賦予待滅菌品在溫度T下的滅菌時間，以分(鐘)表示。由于D值是隨溫度的變化而變化，所以要在不同溫度下達到相同的滅菌效果，F(xiàn)T值將會隨D值的變化而變化。滅菌溫度高時，F(xiàn)T值就小，滅菌溫度較低時，所需FT值就大。
(4)F0值
F0值即標準滅菌時間，系滅菌過程賦予待滅菌物品在121℃下的等效滅菌時間，即T=121℃、Z=10℃時的FT值。121℃為標準狀態(tài)，F(xiàn)0值即為標準滅菌時間，以分(鐘)表示。
(5)滅菌率L
L值系指在某溫度下滅菌1分鐘所相應(yīng)的標準滅菌時間(分鐘)，即F0和FT的比值(L=F0/FT)。當Z=10℃時，不同溫度下的L值是不同的(見表1)。不同Z值下的滅菌率均可查得(見表2)。
(6)無菌保證值(SAL)(Sterility Assurance Level)
無菌保證值為滅菌產(chǎn)品經(jīng)滅菌后微生物殘存概率的負對數(shù)值，表示物品被滅菌后的無菌狀態(tài)。按G際標準，規(guī)定濕熱滅菌法的無菌保證值不得低于6，即滅菌后微生物存活的概率不得大于百萬分之一。
2.滅菌設(shè)備
濕熱滅菌法常用的設(shè)備為高壓
滅菌器。一般為雙層金屬壁組成，是附帶有溫度計或溫度探頭、壓力表、安全閥等裝置的壓力容器。其他如新式旋轉(zhuǎn)
滅菌器、塔式滅菌器等滅菌裝置已被使用。
3.滅菌條件及驗證的基本要求
由于無菌保證值與污染菌耐熱性及污染量有關(guān)，因此在藥品生產(chǎn)的各個環(huán)節(jié)均應(yīng)采取各種有效的手段(包括除菌濾過等措施)來降低待滅菌產(chǎn)品的微生物污染。放入滅菌容器內(nèi)的物品表面必須潔凈且不污染有機物質(zhì)，外面應(yīng)有適宜的包皮寬松的包裹，燒瓶、試管等容器的塞子應(yīng)有金屬箔、紗布或牛皮紙包裹，并用適宜的方式松縛，防止脫落。放入滅菌器內(nèi)的物
品，不能排列過密。根據(jù)物品的性質(zhì)可選擇如下條件進行滅菌：#p#分頁標題#e#
115.5℃ 30分
121.5℃ 20分
126.5℃ 15分
一個滅菌程序的總的標準滅菌時間F0，應(yīng)包括加熱及冷卻過程。它可以用滅菌率對時間求積分的方法計算而得。
上述滅菌程序的F0值不低于8，經(jīng)驗證后，可認為符合要求。
如遇產(chǎn)品對熱極為敏感時，可允許濕熱滅菌的標準滅菌時間F0低于8。但對F0低于8的滅菌程序要求采取特別的措施以確保獲得足夠的無菌保證值。除用生物指示劑進行驗證外，還必須在生產(chǎn)過程中，連續(xù)地、嚴格地對微生物進行監(jiān)控，證明滅菌后無菌保證值不低于設(shè)定的標準。
二、干熱滅菌法
本法系指物質(zhì)在干燥空氣中加熱達到殺滅細菌的方法?？盏牟Ａ骶?、金屬制容器、纖維制品、固體試劑以及若干濕熱不易穿透的物質(zhì)如甘油、液狀石蠟、脂肪油等均可用本法滅菌。
用本法滅菌的物品必須是洗凈且不沾染有機物質(zhì)的，外面應(yīng)有適宜的包皮寬松包裹或裝入封閉的金屬容器內(nèi)。燒瓶、試管等容器的塞子應(yīng)有金屬箔或紗布包裹，并用適宜的方式松縛，防止脫落，放入干熱滅菌箱內(nèi)時，排列不可過密。通?？稍谌缦聴l件下滅菌。
160～170℃ 2小時以上
170～180℃ 1小時以上
250℃ 45分鐘以上
采用干熱250℃ 45分鐘滅菌也可除去滅菌粉針分裝與凍干生產(chǎn)用玻璃儀器中及有關(guān)生產(chǎn)灌裝用具中的熱原物質(zhì)。干熱滅菌程序也應(yīng)驗證，對熱穩(wěn)定的產(chǎn)品應(yīng)規(guī)定污染菌的存活概率應(yīng)小于10-12。
三、除菌濾過法
本法系利用細菌不能通過致密具孔濾材的原理，除去對熱不穩(wěn)定的藥品溶液或液體物質(zhì)中的細菌從而達到無菌要求。過濾器材通常有濾柱、濾膜等。濾柱系用硅藻土或垂熔玻璃等材料制成。濾膜大多是聚合物制成，種類較多，如醋酸纖維素、硝酸纖維素、丙烯酸聚合物、聚氯乙烯、尼龍等，孔徑為0.22μm。
濾器種類規(guī)格較多，發(fā)展較快。G外已普及，G內(nèi)很多企業(yè)也已開始使用彈筒式過濾器等。新置的濾器應(yīng)先用水洗凈。事先滅菌或作在線滅菌，在除菌濾過前后均應(yīng)作過濾器的完好性試驗，即壓力維持試驗或起泡點試驗。過濾器不得對被濾過成分有吸附作用，也不能釋放物質(zhì)；不得使用有纖維脫落的過濾器，禁用含石棉的過濾器。
D、Z、F、F0值的意義
１．D值 微生物的耐熱系數(shù)，指在一定溫度下，將微生物殺滅90%所需的時間。以分鐘表示。
２．Z值
滅菌的溫度系數(shù)，指某一種微生物的D值減少到原來的1/10（下降一個對數(shù)單位）時，所需升高的溫度值（℃），通常取10℃。
３．F與F0值 是驗證滅菌方法可*性的參數(shù)，具有簡單、準確、靈敏的特點。
１）F值 是驗證干熱滅菌法滅菌效果的參數(shù)，其參比溫度是170℃；
２）F0值 是相當于121℃熱壓滅菌時，殺滅容器中全部微生物所需要的時間。
（１）物理F0值
參比溫度是121℃，是以**耐熱的嗜熱脂肪芽胞桿菌作為微生物指示菌，該菌在121℃時，Z值是10℃。數(shù)學表達式：
F0＝△t∑10(T－121)/10 ?。ǎ福玻?br />
顯然，F(xiàn)0值為一定滅菌溫度（T）、Z值為10℃所產(chǎn)生的滅菌效果與121℃、Z值為10℃所產(chǎn)生的滅菌效果相同所相當?shù)臅r間。它是把各溫度下的滅菌效果都轉(zhuǎn)化為121℃下滅菌的等效值。因此，F(xiàn)0值是標準滅菌時間(min)。在滅菌過程中，只要記錄滅菌溫度與時間，就可算出F0值。F0值為8~12min。
（２）生物F0值 其值等于D121值與微生物的對數(shù)降低值的乘積，即：
F0＝D121×（lgN0 －lgNt） （８－３）
式中，N0為微生物的初始數(shù)，Nt為滅菌后預(yù)期達到的微生物殘存數(shù)，又稱染菌度概率。一般Nt達到了10－6，即認為達到了可*的滅菌效果。式中可見，N0越大，滅菌時間越長。故制備過程中應(yīng)盡量減少污染。
